弧菌顯色培養(yǎng)基用法

　　

　　稱取本品18.46g加入200ml蒸餾水，加熱煮沸溶解并不停攪拌，加熱10-20分鐘。冷卻至45-50℃時(shí)，傾入無菌平皿。

　　

　　注意：制備好的培養(yǎng)基一定要保持表面干燥，可在37℃的培養(yǎng)箱中倒置放置1-2小時(shí)。

　　

　　弧菌顯色培養(yǎng)基操作步驟

　　

　　1、按國家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液；

　　

　　2、取1ml樣品液加入9mlSCPB肉湯或堿性蛋白胨水中，37℃增菌培養(yǎng)18-24小時(shí)；

　　

　　3、用3mm接種環(huán)取1環(huán)增菌液，劃線接種到副溶血性弧菌顯色培養(yǎng)基上，做2個(gè)平板；

　　

　　4、37℃培養(yǎng)18-24h，溶血性弧菌顯藍(lán)色至藍(lán)綠色，霍亂弧菌和其它弧菌顯無色，其它細(xì)菌顯黃色或無色且菌落很小；

　　

　　5、對(duì)可疑菌落可劃線接種到營養(yǎng)瓊脂平板上，36±1℃培養(yǎng)12-16小時(shí)，挑取單菌落做副溶血性弧菌全套生化試驗(yàn)。

　　

　　弧菌顯色培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng)

　　

　　1.弧菌顯色培養(yǎng)基配方的選定

　　

　　同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此，除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法，應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外．一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料．加以比較核對(duì)．再依據(jù)自己的使用目的加以選用，記錄其來源。

　　

　　2．培養(yǎng)基的制備記錄

　　

　　每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄，包括培養(yǎng)推各稱，配方及其來源．和各種成份的牌號(hào)。zui終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制各的日期和制備者等，記錄應(yīng)復(fù)制一份，原記錄保存?zhèn)洳椋瑥?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。

　　

　　3.弧菌顯色培養(yǎng)基成分的稱取

　　

　　培養(yǎng)基的各種成分必須稱取并要注意防止錯(cuò)亂．一次完成，不要中斷。可將配方置于傍側(cè)，每稱完一種成分即在配方上做出記號(hào)，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱取完畢后，即移放于右側(cè)。*稱取完畢后．還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。

　　

　　4.弧菌顯色培養(yǎng)基各成份的混合和溶化

　　

　　培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中，使細(xì)菌不易生長。使用不銹鋼鍋加熱溶化．也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng)，以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用，應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后，再用較小火力使所有成分*溶化．迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基，應(yīng)先用一部分水將瓊脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中，因蒸發(fā)而丟失的水分，zui后必須加以補(bǔ)足。

　　

　　5.培養(yǎng)塞pH的初步調(diào)整

　　

　　培養(yǎng)基各成分*溶解后，應(yīng)進(jìn)行pH的初步調(diào)正，因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會(huì)有所變化，例如，牛肉浸液約可降低pH0.2.而腸浸液pH卻會(huì)有顯著的升高。因此，對(duì)這個(gè)步驟，操作者應(yīng)隨時(shí)注意探索經(jīng)驗(yàn)、以期能掌握培養(yǎng)基的zui終pH，保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)正后，還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘，以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。