2024年上半年度，Ausbian®品牌系列血清，助力腫瘤相關研究，幫助多項科研成果成功并發表。本期內容，與締一生物小助手一起，看看各位科學界的同仁都發表了哪些科技論文。

《Research Square》

Deciphering the effects of PYCR family on cell function, prognostic value, immune in ltration in ccRCC and pan-cancer

研究內容：

吡咯-5-羧酸還原酶(PYCR)是將吡咯-5-羧酸(P5C)轉化為脯氨酸的關鍵，脯氨酸是脯氨酸合成的最后一步。PYCR1、PYCR2和PYCR3三種異構體存在，并在腫瘤的發生和發展中發揮著重要的調節作用。在這項研究中，科研人員先通過泛癌癥分析評估PYCRs的分子和免疫特征，特別是關注它們與預后的相關性。然后，建立腎透明細胞癌(KIRC)特異性預后模型，結合病理特征來增強預測能力。通過體外實驗研究PYCR1和PYCR2在腎癌細胞中的生物學功能和調控機制。PYCRs在多種腫瘤中的表達均升高，與不良臨床結果相關。PYCRs在腫瘤信號通路中富集，與免疫細胞濾過、腫瘤突變負荷(TMB)和微衛星不穩定性(MSI)顯著相關。在KIRC中，基于PYCR1和PYCR2的預后模型在統計學上得到了獨立驗證。利用h&e染色圖像的特征，病理特征模型可靠地預測患者預后。體外實驗表明，PYCR1和PYCR2通過激活mTOR通路，至少部分地增強了腎癌細胞的增殖和遷移。

其中，對人腎細胞癌細胞系，即Caki-1、786- 0和A498的體外培養，用到了Ausbian胎牛血清。

《PLOS ONE》

Functional analysis of ESM1 by shRNA-mediated knockdown of its expression in papillary thyroid cancer cells

研究內容：

內皮特異性分子-1 (ESM1)是多種人類癌癥的致癌基因。然而，ESM1在乳頭狀甲狀腺癌(PTC)中的功能尚不清楚。該研究旨在探討ESM1對PTC生長、遷移和侵襲的影響，為PTC的治療提供新的視角。采用免疫組化方法檢測53例腫瘤組織樣本和59例匹配的鄰近正常組織樣本PTC組織中ESM1的表達水平。通過在TPC-1和SW579細胞系中敲低ESM1的表達來研究其在PTC中的作用。此外，通過體外細胞增殖、凋亡、傷口愈合和transwell實驗來評估細胞增殖、遷移和侵襲。結果顯示，ESM1在PTC組織中的表達明顯高于在副腫瘤組織中的表達(P<0.0001)。在體外實驗中，敲低ESM1表達可抑制TPC-1和SW579細胞的增殖、遷移和侵襲。與對照組相比，PTC細胞中ESM1表達下調后，其mRNA和蛋白水平均顯著降低(P<0.01)。此外，敲低esm1的細胞增殖能力降低，遷移和侵襲能力降低(P<0.01, P<0.01, P<0.001)。

得出結論ESM1是PTC發生發展的重要基因，可以促進PTC細胞的增殖、遷移和侵襲。它可能是一個很有前途的診斷和治療靶基因。

其中，對人甲狀腺癌細胞系：TPC-1、SW579和BCPAP的體外培養，用到了Ausbian胎牛血清。

《scientific reports》

Hesperetin promotes bladder cancer cells death via the PI3K/AKT pathway by network pharmacology and molecular docking

研究內容：

膀胱癌(BLCA)患者在手術和化療后仍有高復發率。橙皮苷(Hesperetin, HE)作為一種天然化合物，因其毒性低、易于獲取而備受關注。然而，HE對BLCA的抑制作用尚不清楚。利用網絡藥理學方法預測HE調控的中樞基因和富集途徑在BLCA治療中的作用?？梢暬?span>HE蛋白與樞紐蛋白的分子對接。用菌落和CCK8檢測細胞增殖，用transwell和傷口愈合檢測證實BLCA遷移。此外，通過Hoechst染色、透射電鏡(TEM)和活性氧(ROS)測定證實了細胞凋亡和鐵下垂的發生。Western Blotting驗證中心蛋白、靶功能和通路。SRC, PIK3R1和MAPK1被確定為BLCA中HE的樞紐靶點，涉及PI3k/AKT通路。此外，HE抑制BLCA細胞的增殖和遷移。HE顯著抑制MMP2/MMP9蛋白表達。Bax和cleaved caspase-3的表達增加表明HE可促進BLCA細胞凋亡。此外，Hoechst染色顯示凋亡核的集中和照亮。ROS的激活和GPX4表達的下降提示HE可能通過抗blca過程誘導鐵下垂。HE處理的BLCA細胞線粒體縮小，凋亡小體出現，線粒體嵴減少或缺失?？蒲腥藛T提出HE可以抑制BLCA細胞的增殖和遷移，促進細胞凋亡和鐵下垂。HE可能通過靶向SRC、PIK3R1和MAPK1等蛋白以及PI3K/AKT通路發揮作用。

其中，對人膀胱癌細胞T24(HTB-4)和5637(HTB-9)的體外培養，用到了Ausbian胎牛血清。

《cell death & disease》

Modification of BCLX pre-mRNA splicing has antitumor efficacy alone or in combination with radiotherapy in human glioblastoma cells

實驗內容：

由異常剪接引起的抗凋亡和促凋亡蛋白異構體的失調是癌癥的一個重要標志，并可能導致治療耐藥性。因此，靶向RNA剪接來重定向凋亡相關基因的異構體表達可能會導致有希望的抗癌表型。膠質母細胞瘤(GBM)是成人常見的惡性腦腫瘤。在該研究中，通過RT-PCR和Western Blot分析發現，BCLX pre-mRNA在GBM細胞中存在異常剪接，其中抗凋亡的Bcl-xL剪接更有利。使用剪接開關寡核苷酸(SSOs)調節BCLX pre-mRNA剪接可以有效地提高促凋亡異構體Bcl-xS，而降低抗凋亡的Bcl-xL。SSOs誘導Bcl-xS可激活GBM細胞凋亡和自噬。此外，科研人員發現電離輻射也可以調節BCLX的選擇性剪接。與重(碳)離子輻照相比，低能x射線輻照誘導Bcl-xL/Bcl-xS的比值增加。通過剪接調控抑制Bcl-xL可顯著增強二維和三維GBM細胞的輻射敏感性。這些結果表明，通過剪接開關寡核苷酸操縱BCLX前mrna選擇性剪接是一種單獨或聯合放療抑制膠質母細胞瘤腫瘤發生的新方法。

其中，對膠質母細胞瘤：A172, T98G, U251, U87, GSCs(人膠質瘤干細胞樣細胞)，以及正常的人星形膠質細胞系HA1800的體外培養實驗，均用到了Ausbian胎牛血清。

《APS》

O-GlcNAcylation mediates H2O2-induced apoptosis through

 regulation of STAT3 and FOXO1

研究內容：O-linked-β- n -乙酰氨基葡萄糖(O-GlcNAc)糖基化(o - glcnac?；?span>)是一種關鍵的翻譯后修飾，將外部刺激與細胞內信號轉導網絡偶聯。然而，o - glcn?；谘趸瘧ふT導的細胞凋亡中的關鍵蛋白靶點仍有待闡明。在這里，我們發現H2O2處理抑制o - glcn?；?，損害細胞活力，增加裂解caspase 3，加速神經母細胞瘤N2a細胞的凋亡。O-GlcNAc轉移酶(OGT)抑制劑OSMI-1或O-GlcNAcase (OGA)抑制劑Thiamet-G分別增強或抑制h2o2誘導的細胞凋亡。OSMI-1抑制了總蛋白和磷酸化蛋白水平以及轉錄因子3 (STAT3)和叉頭盒蛋白O1 (FOXO1)的啟動子活性。相反，過表達OGT或用Thiamet-G處理會增加STAT3和fox01的總蛋白水平。STAT3或FOXO1過表達可消除osmi -1誘導的細胞凋亡。而在H2O2處理的細胞中，OGT和Thiamet-G的抗凋亡作用通過下調內源性STAT3或fox01的表達或活性而被消除。這些結果表明STAT3或fox01是參與H2O2誘導的N2a細胞凋亡的o - glcnac?；臐撛诎悬c。

其中，對神經元-2a神經母細胞瘤細胞（N2a Cell）的體外培養，用到了Ausbian胎牛血清。

《Biology Direct》

RPL35A promotes the progression of cholangiocarcinoma by mediating HSPA8 ubiquitination

研究內容：

膽管癌(CCA)是一種膽道上皮惡性腫瘤，在世界范圍內發病率不斷上升。因此，需要進一步了解CCA進展的分子機制，以確定新的治療靶點。免疫組化染色檢測RPL35A在CCA和癌旁組織中的表達。IP-MS聯合Co-IP鑒定了RPL35A調控的下游蛋白。采用Western blot和Co-IP對CHX或MG-132處理的CCA細胞進行檢測，驗證RPL35A對HSPA8蛋白的調控作用。通過細胞實驗和裸鼠皮下腫瘤發生實驗，在體內評價RPL35A和HSPA8對CCA細胞增殖、凋亡、細胞周期、遷移和腫瘤生長的影響。RPL35A在CCA組織和細胞中顯著上調。RPL35A敲低抑制hcc -9810和HUCCT1細胞的增殖和遷移，誘導細胞凋亡，使細胞周期停留在G1期。HSPA8是RPL35A的下游蛋白，在CCA中過表達。RPL35A敲低會損害HSPA8蛋白的穩定性，增加HSPA8蛋白的泛素化水平。RPL35A過表達促進CCA細胞增殖和遷移。HSPA8敲低抑制CCA細胞增殖和遷移，逆轉RPL35A的促進作用。此外，RPL35A在體內促進腫瘤生長。相反，HSPA8敲低抑制腫瘤生長，同時能夠恢復RPL35A過表達的效果。RPL35A在CCA組織中表達上調，通過介導HSPA8泛素化促進CCA的進展。

其中，對4種膽管癌細胞系(hcc -9810、HUCCT1、QBC939、RBE細胞)和人肝內膽管上皮細胞(HIBEC細胞)的體外培養，均用到了Ausbian胎牛血清。

《PLOS PATHOGENS》

Serine protease Rv2569c facilitates transmission of Mycobacterium tuberculosis via disrupting the epithelial barrier by cleaving E-cadherin

研究內容：

上皮細胞是抵御病原體入侵的主要防線。然而，細菌病原體具有破壞這一屏障并促進細菌遷移的能力。然而，結核分枝桿菌(M.tb)在這一過程中所采用的具體分子機制尚不清楚?？蒲腥藛T通過評估Rv2569c切割e -鈣粘蛋白的能力來研究Rv2569c在結核分枝桿菌易位中的作用，e -鈣粘蛋白是細胞-細胞粘附連接的重要組成部分，在細菌入侵期間被破壞。利用在大腸桿菌中表達并通過親和層析純化的重組Rv2569c，科研人員證明了Rv2569c具有細胞壁相關絲氨酸蛋白酶活性。此外，Rv2569c能夠降解一系列蛋白質底物，包括酪蛋白、纖維蛋白原、纖維連接蛋白和e -鈣粘蛋白?？蒲腥藛T還確定了Rv2569c蛋白酶活性的適宜條件是溫度為37℃，pH為9.0,MgCl2存在。為了研究Rv2569c在結核分枝桿菌中的功能，科研人員制備了Rv2569c的缺失突變體及其補充菌株，并將其用于感染A549細胞和小鼠。A549細胞感染實驗結果顯示，Rv2569c具有裂解E-cadherin的能力，促進M.tb通過極化的A549上皮細胞層遷移。此外，體內感染實驗表明，Rv2569c可以破壞E-cadherin，增強M.tb的定植，并在C57BL/6小鼠的肺部引起病理損傷。總之，這些結果強烈表明結核分枝桿菌利用絲氨酸蛋白酶Rv2569c破壞上皮防御，并通過跨越上皮屏障促進其全身傳播。

其中，對肺腺癌細胞系A549的體外培養，用到了Ausbian胎牛血清。