支原體祛除劑是用于清除細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的試劑,以下是一些常見產(chǎn)品及其特點(diǎn):
一、按成分與作用機(jī)制分類
復(fù)合抗生素類
代表產(chǎn)品:Zell Shield®(德國(guó)Minerva Biolabs)、Plasmocin™(Invivogen)
作用機(jī)制:通過抑制支原體DNA和蛋白質(zhì)合成實(shí)現(xiàn)廣譜清除,同時(shí)對(duì)細(xì)菌、真菌有效。
特點(diǎn):
廣譜性:Zell Shield®可抑制多種革蘭氏陽性和陰性細(xì)菌、霉菌、酵母及原蟲;Plasmocin™含大環(huán)內(nèi)酯和氟喹諾酮,雙重阻斷細(xì)菌DNA復(fù)制和蛋白質(zhì)合成。
安全性:對(duì)真核細(xì)胞無毒性,Zell Shield®經(jīng)證實(shí)對(duì)大多數(shù)細(xì)胞株安全,Plasmocin™在低濃度下不影響細(xì)胞代謝。
穩(wěn)定性:Zell Shield®在細(xì)胞培養(yǎng)期間活性穩(wěn)定,Plasmocin™含轉(zhuǎn)運(yùn)載體可穿透細(xì)胞殺滅胞內(nèi)支原體。
直接殺滅類
代表產(chǎn)品:Mynox®、Mynox® Gold(德國(guó)Minerva Biolabs)
作用機(jī)制:Mynox®通過改變支原體膜通透性導(dǎo)致其破裂死亡,Mynox® Gold結(jié)合Mynox®與抗生素實(shí)現(xiàn)“直接殺滅+鞏固防護(hù)”。
特點(diǎn):
高效性:Mynox®可在2-3小時(shí)內(nèi)除去支原體,Mynox® Gold通過兩步處理防止復(fù)發(fā)。
針對(duì)性:適用于珍貴樣本或病毒收獲液等無法長(zhǎng)期培養(yǎng)的場(chǎng)景,Mynox® Gold可處理可培養(yǎng)超過一個(gè)月的細(xì)胞。
雙重作用類
代表產(chǎn)品:上海炎熙生物Mycoplasma Elimination Reagent
作用機(jī)制:含大環(huán)內(nèi)酯和喹諾酮,同時(shí)抑制細(xì)菌DNA復(fù)制和蛋白質(zhì)合成。
特點(diǎn):
雙重阻斷:在DNA和蛋白質(zhì)層面抑制細(xì)菌生長(zhǎng),增強(qiáng)除菌效果。
低毒性:對(duì)真核細(xì)胞無毒,高濃度下僅暫時(shí)抑制線粒體呼吸,移除后細(xì)胞恢復(fù)生長(zhǎng)。
二、按使用場(chǎng)景分類
常規(guī)污染清除
適用產(chǎn)品:Zell Shield®、Plasmocin™、上海炎熙生物試劑
操作建議:
Zell Shield®按1:100加入培養(yǎng)基,連續(xù)培養(yǎng)三代并配合懸浮沖洗法(PBS清洗細(xì)胞3次,低速離心棄上清)。
Plasmocin™以25μg/ml濃度處理兩周,或2.5-5mg/ml用于預(yù)防。
上海炎熙生物試劑稀釋1000倍后加入培養(yǎng)基,孵化一周并換液,最后用無試劑培養(yǎng)基確認(rèn)無污染。
珍貴樣本處理
適用產(chǎn)品:Mynox®、Mynox® Gold
操作建議:
Mynox®直接處理樣本3小時(shí),快速除去支原體。
Mynox® Gold分兩步:治療液處理后,用鞏固防護(hù)液培養(yǎng)一個(gè)月,傳代三代確保清除。